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動(dòng)物源PCR熒光探針法

發(fā)布時(shí)間:2024-12-23 15:19:41   來源:青島力拓機(jī)械有限公司   閱覽次數(shù):15次   

巧亦捷(ingeNova)是翊新診斷技術(shù)(蘇州)有限公司旗下專注于動(dòng)物體外診斷檢測(cè)的產(chǎn)品品牌,,以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創(chuàng)生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產(chǎn)品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測(cè),、貓消化道疫病檢測(cè),、犬消化道疫病檢測(cè)、寄生蟲等寵物核酸檢測(cè),,非洲豬瘟,、藍(lán)耳等豬病核酸檢測(cè),牛逼支,、牛腹瀉等牛羊類食品動(dòng)物的核酸檢測(cè),,人畜共患病核酸檢測(cè),以及魚蝦等水生動(dòng)物的核酸檢測(cè),。全自動(dòng)薄膜微流控核酸檢測(cè)一體機(jī)是巧亦捷系列產(chǎn)品的主打檢測(cè)平臺(tái),巧亦捷基于此平臺(tái)技術(shù)致力于為客戶提供快速,、精確的動(dòng)物疫病診斷整體解決方案,。在寵物醫(yī)療中,目前病毒檢測(cè)主要包括膠體金檢測(cè)(試紙)和PCR檢測(cè),。動(dòng)物源PCR熒光探針法

動(dòng)物源PCR熒光探針法,PCR

開展動(dòng)物疫病檢測(cè),,有利于及時(shí)明確動(dòng)物病因及根源所在,降低疫病發(fā)生率,,提高診療效果,,促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展??梢詫?duì)動(dòng)物疫病起到預(yù)防作用,,真正準(zhǔn)確分析當(dāng)前動(dòng)物疫病的流行特征及其可能對(duì)周邊造成的危害。提高動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量,,使人們的食品安全得到盡可能的保障?,F(xiàn)階段主流的動(dòng)物疫病檢測(cè)方法主要有傳統(tǒng)檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)和核酸檢測(cè),。核酸檢測(cè)作為動(dòng)物疫病檢測(cè)中常用的方法之一,,具有實(shí)驗(yàn)周期短、靈敏度高,、特異性強(qiáng),、實(shí)時(shí)定量等優(yōu)勢(shì)。江蘇動(dòng)物疾病PCR動(dòng)物檢疫巧亦捷的品牌主張為:用心關(guān)愛每一個(gè)生命健康,。

動(dòng)物源PCR熒光探針法,PCR

樣本處理,、核酸提取,、PCR擴(kuò)增和數(shù)據(jù)處理是PCR的四個(gè)步驟。其中核酸提取可以幫助研究人員準(zhǔn)確地快速地分離細(xì)胞或分子材料中的有效核酸,,并獲得足夠的樣本為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供依據(jù),。無論是病毒、細(xì)菌還是體細(xì)胞,,遺傳物質(zhì)都不是裸露在細(xì)胞外,,都是在細(xì)胞內(nèi)。需要有一個(gè)核酸提取試劑將遺傳物質(zhì)釋放到外界,,保證PCR反應(yīng)效率,。將核酸釋放出來后,提取與純化過程中同樣需要將樣本中的一些PCR抑制物去除掉,,獲得純度比較高的核酸,,比較大限度的保證PCR反應(yīng)中抑制物的濃度降低,提高核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性,。因此核酸提取與純化這一步,,也是保證PCR反應(yīng)結(jié)果的關(guān)鍵一步。巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)采用磁珠法提取,,效率高且可確保結(jié)果更準(zhǔn)確,。

PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復(fù)制核酸片段并提高DNA產(chǎn)量的技術(shù),即所謂的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),,這種技術(shù)可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)大量復(fù)制特定的基因片段,。由于其高敏感性和高特異性的特點(diǎn),PCR技術(shù)被應(yīng)用在寵物疾病分子的診斷上,,將從疑似患病寵物(血液,、眼鼻分泌物、糞便,,尿液或腹水)中采樣的極微量病原(細(xì)菌,、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本,透過PCR的方式大量被復(fù)制,,再以核酸電泳的方式判讀結(jié)果,,從而獲得早期、快速,、穩(wěn)定和準(zhǔn)確的診斷結(jié)果.PCR檢測(cè)正越來越多的被動(dòng)物臨床醫(yī)師所接受,,并廣泛應(yīng)用于動(dòng)物臨床疾病診斷。

動(dòng)物源PCR熒光探針法,PCR

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,,由一對(duì)特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),,三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),,以一對(duì)人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物,,第一步,,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,,目的基因作為模板,,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈,。第二步,,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,,引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對(duì),。第三步,引物的延伸,,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán),,2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán),,2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段,、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。寵物傳染病檢測(cè)技術(shù)方面,,核酸檢測(cè)方法具有極高的靈敏度和特異性,,可很大程度縮短傳染病檢測(cè)的窗口期。動(dòng)物源PCR熒光探針法

傳統(tǒng)的免疫學(xué)檢測(cè)(如:熒光和膠體金)存在靈敏性和特異性的局限性,。動(dòng)物源PCR熒光探針法

巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)的特異性及靈敏度可達(dá)99%以上,,使用的PCR熒光探針技術(shù)不但可以檢測(cè)出病毒的種類,更可以檢測(cè)出樣品里100個(gè)/ul數(shù)量級(jí)的病毒數(shù)量,,可謂特異性極強(qiáng),,準(zhǔn)確度極高!若檢測(cè)出有病毒,,但沒有發(fā)病也要引起重視,,因?yàn)闄z測(cè)的病毒是一些對(duì)動(dòng)物機(jī)體傷害極大的病毒,或者是人畜共患病,,雖然現(xiàn)在沒有發(fā)病,,并不表明以后不會(huì)發(fā)病,如果任其在體內(nèi)發(fā)展,,等到病毒繁殖到一定的數(shù)量后,,或者機(jī)體的抵抗力突然下降,,也許就會(huì)發(fā)生災(zāi)難性的爆發(fā),對(duì)動(dòng)物造成極大的傷害,。動(dòng)物源PCR熒光探針法

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