目前為止已鑒別了2500余種miRNAs分子,。例如，血液外泌體miR-21的升高已被證實與胰腺ai,、結直腸ai,、肝ai、乳腺ai,、卵巢ai及食管ai等多種中流相關,，可能與其參與中流xue管生成有關，研究表明肺ai細胞釋放的外泌體miR-21會通過STAT3依賴機制誘導周圍支氣管細胞血管內皮生長因子（vascularendothelialgrowthfactor,，VEGF）的產(chǎn)生,，從而促進血管生成。在食管ai中,，miR-21還可以反映中流的惡性程度,，食管ai患者的miR-21水平與良性中流患者相比急劇上升，上升的miR-21水平也與中流的淋巴侵襲和轉移相關,。在膀胱ai患者中,，尿液中的miR-21和miR-4454會明顯上調。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,。外泌體提取 方法

外泌體普遍參與細胞間物質運輸與信息傳遞,，調控細胞生理活動。同時,，外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化,、促進種瘤發(fā)生和轉移等作用,；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。外泌體相關數(shù)據(jù)庫有哪些,？lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA，包括circRNA,、lncRNA和mRNA,。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白,、mRNA、miRNA,、脂類等信息,。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人、大鼠,、小鼠,、綿羊等幾個物種的286個研究結果，涉及蛋白,、mRNA,、miRNA、脂類等信息,。外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡,。外泌體提取 方法外泌體在化療藥物的促轉移過程中具有重要的作用。

在免疫系統(tǒng)中,，淋巴細胞,、樹突狀細胞、巨噬細胞,、肥大細胞等均可以產(chǎn)生外泌體,。研究表明免疫細胞來源的外泌體能夠明顯影響機體的免疫調節(jié)機制，包括調節(jié)抗原呈遞,、免疫激huo,、免疫監(jiān)督等。不同免疫細胞來源的外泌體功能不同,，以樹突狀細胞(該細胞具有免疫刺激能力,，是目前能夠激huo初始T細胞的抗原遞呈細胞)來源的外泌體為例，其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細胞的成熟狀態(tài),。成熟的樹突狀細胞外泌體內包含能夠直接激huoT細胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ,，共刺激分子如CD40、CD8,、CD86和熱激蛋白,，這些分子使樹突狀細胞來源的外泌體具有抗原呈遞、調節(jié)免疫響應的生物功能,。

利用蛋白質免疫印跡和酶聯(lián)免疫吸附分析技術可以對外泌體標志性蛋白質進行定性定量分析,。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經(jīng)典表征手段之一，操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照,。常用的外泌體標志性蛋白質包括四跨膜蛋白質CD63,、CD81、CD9,、中流易感基因101蛋白(TSG101),、水通道蛋白2(AQP2,，尿液中)和凋亡誘導因子6相互作用蛋白(Alix)等,，內參蛋白質可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脫氫酶,，陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB，線粒體標志蛋白)或鈣聯(lián)結蛋白Calnexin,。在酶聯(lián)免疫吸附析法中,，外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質，隨后與檢測抗體共孵育,。兩種方法均存在操作繁瑣,、耗時長的問題，相比較而言,，酶聯(lián)免疫吸附分析法比蛋白質免疫印跡法更加快速,，適用于高通量分析。神經(jīng)細胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關的分子,。

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態(tài)光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應用于外泌體顆粒數(shù)目和粒徑分布的測量,，但兩種方法也各有不足。動態(tài)光散射法中散射光強度依賴于顆粒質量(體積),，混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴重影響測量結果,，因此動態(tài)光散射法更適用于單分散體系。而且動態(tài)光散射法所得的結果強烈依賴于所應用的數(shù)學算法,。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進行檢測時,，為了得到準確的濃度和粒徑信息，需要根據(jù)所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準,，操作繁瑣,。受檢測靈敏度所限，納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm～1μm的顆粒,，粒徑小于50nm的外泌體無法檢測,。除此之外，兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運動進行分析,，難以區(qū)分合成的納米材料,、大蛋白質聚合體和生物囊泡。外泌體由于包含的內容物具有明顯的組織特異性,，為其能成為瘤早期診斷的生物標志物提供了重要保障,。外泌體主要成分是什么

建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。外泌體提取 方法

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,，包括內皮細胞,、免疫細胞、血小板,、平滑肌細胞等,。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸,、脂類等來調節(jié)受體細胞的生物學活性,。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而喚醒靶細胞細胞內的信號通路,。二是在細胞外基質中,，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合,，從而喚醒細胞內的信號通路,。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,，非選擇性的釋放其所含的蛋白質,、mRNA以及microRNA。外泌體提取 方法