滅菌:分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。滅菌的方法種類如下:1.高壓蒸汽滅菌法:大多數(shù)熱培養(yǎng)基都可用此法,,小量分裝時(shí),,用121℃,、15min,;滅菌量大時(shí),用121℃,、30min滅菌,;含糖類的培養(yǎng)基只能113℃~115℃、15min滅菌,,避免糖類遭破壞,。2.煮沸滅菌:對(duì)含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基,可使用此方法,。3.過(guò)濾除菌:以過(guò)濾的方法除菌,,用無(wú)菌操作技術(shù),定量加入培養(yǎng)基,。血液,、物品可用無(wú)菌操作技術(shù)抽取,加入冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基中,。培養(yǎng)基含有不耐熱的物質(zhì)時(shí),,可用此法。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):無(wú)需排干空氣,。湖北Systec培養(yǎng)基制備器
固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的,。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,,使細(xì)菌不易生長(zhǎng),。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化,。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),、以防焦化,、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,,應(yīng)重新制備,。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸,。如為瓊脂溶化,,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合,。在加熱溶化過(guò)程中,,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補(bǔ)足,。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中,、pH會(huì)有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,,應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正,。北京大容量 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器全自動(dòng)控制程序,確保內(nèi)部溫度均一,。
制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):用過(guò)的玻璃器皿:凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿,,使用后可隨時(shí)沖洗,吸取過(guò)化學(xué)試劑的吸管,,可先浸泡于清水中,,待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,,必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)消毒后,,將污垢除去,用皂液洗刷,,再用流水沖洗干凈,。若用皂液未能洗凈的器皿,可用洗液浸泡適當(dāng)時(shí)間后再用清水洗凈,。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,,其作用是將有機(jī)物氧化成可溶性物質(zhì),以便沖洗,。洗液有很強(qiáng)的腐蝕作用,,使用時(shí)應(yīng)特別小心,避免濺到衣服,、身體和其他物品上,。
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,,具體培養(yǎng)基按食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定進(jìn)行滅菌,。培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過(guò)1000mL,否則滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱,。所有的操作應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行,。滅菌效果的控制是關(guān)鍵問(wèn)題,。加熱后采用適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,以防加熱過(guò)度,。這對(duì)于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要,,例如含有煌綠的培養(yǎng)基。過(guò)濾除菌:過(guò)濾除菌可在真空或加壓的條件下進(jìn)行,。使用孔徑為0.2μm的無(wú)菌設(shè)備和濾膜,。消毒過(guò)濾設(shè)備的各個(gè)部分或使用預(yù)先消毒的設(shè)備。一些濾膜上附著有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)(如物品),,為了達(dá)到有效過(guò)濾,,應(yīng)事先將濾膜用無(wú)菌水潤(rùn)濕。培養(yǎng)基制備器解凍血清時(shí),,請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),。
一種斜面培養(yǎng)基制備器,包括底板,,所述底板左右兩側(cè)分別固定一塊側(cè)板,,底板前側(cè)設(shè)置一塊擋板,兩塊所述側(cè)板上對(duì)應(yīng)著開(kāi)設(shè)一條豎直縫并分別在豎直縫前后側(cè)開(kāi)設(shè)若干條水平縫,,還包括一根靠桿,,靠桿兩端分別穿過(guò)兩側(cè)板上對(duì)應(yīng)水平縫并以可拆卸連接方式固定。作為選擇,,所述擋板內(nèi)側(cè)從左到右等間隔設(shè)置若干隔板,,所述靠桿上從左到右等間隔設(shè)置與隔板數(shù)量對(duì)應(yīng)的固定凸塊??織U與側(cè)板之間的連接方式有兩種選擇方式,。第一種為:所述靠桿一端卡在水平縫外,另一端設(shè)置螺紋段并用螺母實(shí)現(xiàn)與側(cè)板之間的固定,。培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì),,在細(xì)菌和細(xì)胞培養(yǎng)中十分必要。湖北Systec培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,,較好一次完成,,不要中斷。湖北Systec培養(yǎng)基制備器
MS培養(yǎng)基的特點(diǎn):MS培養(yǎng)基普遍被使用,,它的無(wú)機(jī)鹽濃度較高,,十分有利于組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)和加速愈傷組織的生長(zhǎng)。因?yàn)榕浞街械碾x子濃度高,,在配制,、貯存、消毒等過(guò)程中,,即使有些成分略有出入,也不會(huì)對(duì)離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來(lái)對(duì)愈傷組織可以進(jìn)行誘導(dǎo),,或者用來(lái)培養(yǎng)胚,、莖段、莖尖及花藥,。在進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),,它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,,有比較適當(dāng)比例和數(shù)量的無(wú)機(jī)養(yǎng)分,,能夠滿足植物細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)上和生理上的需要。所以,,通常情形下,,氨基酸、酪蛋白水解物,、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分不需要再被添加,。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,,這亦是其的明顯特征,。湖北Systec培養(yǎng)基制備器