外泌體起源于多泡體,以細胞管腔內(nèi)囊泡的形式存在.細胞的胞吞形成帶有外源性抗體的內(nèi)體小泡,在高爾基體等細胞器的作用下形成早期核內(nèi)體,早期核內(nèi)體的囊膜內(nèi)陷,、突入形成多個小囊泡,并選擇性的接受細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,、脂類等成分,較終形成晚期核內(nèi)體,晚期核內(nèi)體與細胞膜融合,并將外泌體排出胞外,。這是一個連續(xù)而又復雜的過程,從內(nèi)體小泡到成熟外泌體,需要在各細胞器間傳遞并包裝,包括:TSG101、Alix蛋白,、CD63,、CD81、神經(jīng)酰胺,、膽固醇等,。外泌體的排出跟其他胞內(nèi)小泡大致相同,受到Rab家族蛋白的調(diào)控,敲除細胞的Rab27a和Rab27b蛋白后,外泌體不能排出,且從高爾基體到晚期核內(nèi)體的囊泡運輸不受影響。從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,,在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定,。血細胞提取試劑盒服務(wù)
Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質(zhì)細胞來源外泌體與胰腺ai細胞共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)裝載紫杉醇的間充質(zhì)細胞外泌體具有很強的抗中流增殖效果,。Tian等為降低免疫原性與毒性,,采用小鼠未成熟樹突狀細胞所產(chǎn)生外泌體作為藥物載體。同時為實現(xiàn)外泌體運輸?shù)陌邢蛐?,使細胞表達能夠識別乳腺ai細胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,,溶酶體相關(guān)膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法,,在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細胞外泌體中載入阿霉素,。結(jié)果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織,抑制中流生長且無明顯毒性,。研究所提取試劑盒產(chǎn)品標準外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,。
各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達,由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞,,期望開發(fā)利用該特征的新型DDS,。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解,。另外在從體液中提取外泌體后,,體液可長期穩(wěn)定保存,,因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測出,,特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體,,其與正常細胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目,并作為癥狀早期診斷技術(shù),,應用于與癥狀進展相關(guān)的研究,。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病,、膀胱疾病的新型診斷標記,,髓液中的外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標記物。
液體活檢是一種非侵入性的血液檢測突破性技術(shù),,能早期快速地檢測中流及其病灶或者轉(zhuǎn)移過程中釋放到血液中的循環(huán)中流細胞(circulatingtumorcell,,CTC)、循環(huán)中流DNA(circulatingtumorDNA,,ctDNA)和中流外泌體等中流組分,。中流外泌體作為液體活檢的一個重要組成,基于其內(nèi)容物成分多樣和穩(wěn)定等優(yōu)勢,,正成為中流標志物相關(guān)研究的熱點,。中流來源納米大小的外泌體具有易通過血腦屏障、天然的歸巢特性,、雙分子層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和高效的生物相容性等特征,。因此,中流外泌體正成為中流靶向zhiliao理想的載體,,尤其是工程化外泌體更表現(xiàn)出很好的中流靶向干預和增強藥物zhiliao的效果,。外泌體可以作為生物標志物來對疾病進行檢測。
人體內(nèi)多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,,包括干細胞,、免疫細胞、內(nèi)皮細胞,、血小板及平滑肌細胞等。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中,。雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物,,使外泌體能夠在組織中長距離移動。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖,、遷移,、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用,,有望成為“無細胞的細胞治理”工具,。干細胞來源的外泌體可通過囊泡,將干細胞的精華部分——mRNA、miRNA,、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì),,打包運出干細胞體外。通過“細胞間高速公路”來“快遞”到人體各個組織內(nèi),。必須慎重分析得到的是否是外泌體,。細胞上清外泌體Dil
目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法,、PEG沉淀法,。血細胞提取試劑盒服務(wù)
外泌體作為藥物遞送載體較以往的合成系統(tǒng)具有多方面的優(yōu)勢,比如:人工遞送載體具有更低的免疫原性,,其含有的磷脂雙分子層可與靶細胞細胞膜融合,,從而避廉價核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬作用。Srivastava等開發(fā)了一種基于外泌體-金奈米粒子(Exo-GNP)的藥物遞送系統(tǒng)—“nanosomes”用于肺病的醫(yī)治,,研究表明該系統(tǒng)與單用多柔比星醫(yī)治相比,,前者的多柔比星釋放量增加、攝取率提高,、化療毒性降低且化療效果增強,。此外,還有研究發(fā)現(xiàn),,使用外泌體運載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細胞對PTX的吸收,,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展,。血細胞提取試劑盒服務(wù)